传统的反向遗传学，例如用转座子（transposon）敲除特定基因，虽然可以准确测定表型，但需要进行耗时的转基因或复杂的组织培养。而且由于这种基因敲除的方法将整个基因敲除，无法观察到活性基因功能部分缺失的结果。

为克服此基因敲除方法的局限性，进一步获得关于活性基因突变的信息，Fred Hutchinson癌症研究中心的研究者们发明了一种定向诱导基因组局部突变（TILLING： Targeting Induced Local Lesions In Genomes）技术。该方法具有简单高效的特点，它利用化学突变方法来获得所有基因的传统的点突变等位基因系列。对那些表型分析时会牵涉到亚致死等位基因的重要基因，TILLING的方法具有其独特的优势。随着TILLING方法有效应用到越来越多的生物种类，如果蝇，拟南芥，斑马鱼，玉米等，它在遗传学研究方面的重要价值也越发体现出来。

但由于点突变一般很难被检测出来，一直是TILLING技术应用上的一个障碍。要得到好的结果，要求检测仪器不仅灵敏度高，还能够识别假阳性位点。我们在这儿给大家引荐一种更简便，灵敏，准确的高通量TILLING分析技术：双色红外荧光检测技术。

双色红外荧光检测技术是美国LI-COR公司的专利技术。LI-COR长期致力于此项技术在生物学研究中的应用，他们开发的Odyssey双色荧光扫描系统及DNA遗传分析系统都取得了很大成功。由于杂质、干扰分子在红外区几乎不发光，用红外荧光进行检测的背景非常低，灵敏度很高，可检测到低达15amoles的荧光分子。加上双通道检测（680nm激发，710nm检测；780nm激发，820nm检测），两个通道检测波长相距110nm，相对于通常的可见荧光四色检测来说，几乎没有光谱重叠的干扰（见下图），保证了TILLING分析中每一个突变碱基的准确识别及整个检测的灵敏度。